产品描述
1 作为蛋白质印迹领域的新发明,iBlot®干式转印系统能在7分钟内将蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶快速、地转移出来。
2 采用干式转印时,无需像湿式或半干式转印时使用缓冲液或其它液体试剂,从而降低了实验结果的变异性。
3 iBlot®转印系统比湿式或半干式方法效率更高,而且检测灵敏度更高。可使用较少的样品获得准确的检测结果。
4 无需进行繁琐的转印设备组装,蛋白质转印可迅速完成,早上进行凝胶电泳,那么在一天结束时就能获得实验结果。
5 不会产生含有甲醇的废液,十分环保。
特点与优点
1 快速:7 分钟或更短时间内完成蛋白质转移;
2 重复性好:减少转印准备步骤,降低运行偏差;
3 灵敏:均匀转印少量样品;
4 方便:式设备;无需缓冲液或者外部电源;
技术窍门
为了改善高分子量蛋白的转移效果:
转移前应将凝胶放入100 mL平衡缓冲液(2X NuPAGE®转移缓冲液,含10%甲醇和1:1000 NuPAGE®抗氧化剂) 中,并置于摇床上于室温下平衡20分钟,或者使用NuPAGE® Tris-乙酸凝胶。使用上述凝胶可转移分子量400 kDa以上的蛋白。
(客户报道曾成功从NuPAGE® Tris-乙酸3-8%的凝胶中转移出分子量500 kDa以上的蛋白)
规格参数
方法 性能 |
干转 iBlot® Blotting System |
半干转移 Semi-Dry Transfer |
湿转 Wet Transfer |
转移Buffer |
无 |
100–250 mL |
1–1.5 L或者注满转移槽 |
转移时间 |
7 min 2min准备时间, |
45–90 min, |
1 hr–过夜, |
转移效果 |
高重复性和高转移率(11~220kDa蛋白): 转移操作手册对于免疫印迹而言优化; 比如:转移膜高亲和力和检测力。 |
效率低,可重复性差: 1.Buffer的量限制转移时间,尤其是中等和大分子量的蛋白; 2.小分子量的蛋白容易转出; 3.凝胶,膜和滤纸大小一致,否则容易发生短路; |
高转移率,结果可靠: 转移过程中温度升高,需要冷却Buffer以保证电流的相对稳定; 在高电流作用下转移时间需要1–2小时; |
额外设备要求 |
无 |
供电装置 |
供电装置 |
转移要求 |
无 |
浸泡的滤纸需处理; 电需要定期维护; |
大量有害液体丢弃; 浸泡的海绵需清洁; 电需要定期维护; |
方法
性能
|
干转
iBlot® Blotting System
|
半干转移
Semi-Dry Transfer
|
湿转
Wet Transfer
|
转移Buffer
|
无
|
100–250 mL
|
1–1.5 L或者注满转移槽
|
转移时间
|
7 min
2min准备时间,
|
45–90 min,
70 min准备时间 |
1 hr–过夜,
50 min准备是假 |
转移效果
|
高重复性和高转移率(11~220kDa蛋白):
转移操作手册对于免疫印迹而言优化;
比如:转移膜高亲和力和检测力。
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效率低,可重复性差:
1.Buffer的量限制转移时间,尤其是中等和大分子量的蛋白;
2.小分子量的蛋白容易转出;
3.凝胶,膜和滤纸大小一致,否则容易发生短路;
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高转移率,结果可靠:
转移过程中温度升高,需要冷却Buffer以保证电流的相对稳定;
在高电流作用下转移时间需要1–2小时;
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额外设备要求
|
无
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供电装置
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供电装置
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转移要求
|
无
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浸泡的滤纸需处理;
电需要定期维护;
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大量有害液体丢弃;
浸泡的海绵需清洁;
电需要定期维护;
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